古莎泰克诺维8100包埋试剂盒Technovit 8100是一种基于HEMA的塑料嵌入系统，适用于通过光学显微镜进行的研究。在医学、动物学和植物学领域内，其适用于所有组织的嵌入。脱钙切片或简单脱钙髂嵴活组织检查切片和植入生物材料切片可以用于包括组织染色在内的多种应用；此外，它们还可用于酶化学和免疫组织化学。

古莎泰克诺维8100包埋试剂盒

      古莎泰克诺维8100包埋试剂盒Technovit 8100是一种基于HEMA的塑料嵌入系统，适用于通过光学显微镜进行的研究。在医学、动物学和植物学领域内，其适用于所有组织的嵌入。脱钙切片或简单脱钙髂嵴活组织检查切片和植入生物材料切片可以用于包括组织染色在内的多种应用；此外，它们还可用于酶化学和免疫组织化学。

材料特性

Technovit 8100是由几乎无味的增塑剂和亲水性塑料组成的一种混合物。Technovit 8100专门开发用于低温聚合（+4°C温度条件下）。

聚合系统对氧气灵敏，所以嵌入模板必须密封硬化。

优势概述

n 由于单个组分的质量控制恒定，并且采用编档记录，嵌入具有再现性和可靠性

n 由于使用专用催化剂系统和特氟隆结构，聚合可在10°C至0°C低温条件下进行 

n 块料硬化均匀，因此可以形成最薄的均匀切片

n 制品收缩性较低，因此具有优异的组织形态

n 可以进行常规的染色、酶检测和免疫组织化学

n 血液性髂嵴活组织检查无需进行脱钙。

由于增塑剂和催化剂体系的特殊组合，产生毒性较低

应用

按照逐步操作指导来制备Technovit 8100。将固定的脱水样本放在浸液中。保持样本低温和搅拌样本有益于整个嵌入过程。

聚合反应

按照操作指导制备聚合混合物，然后填入嵌入腔。将已浸润样本放入其中。使用薄膜密封嵌入腔。将其放在预冷凝胶板或薄冰层上，在4°C温度条件下进行硬化。

聚合结束，HistoblocR和TechnovitR 3040发生堵塞后，将薄膜移除。

在染色或反应前，不可能将塑料洗脱。

产品数据

并不一定需要遵循以下固定和脱水操作指导。还可在进行其他预处理后对Technovit进行浸润和聚合。

必须全程使用气密性玻璃容器或一次性PE容器（大约 20ml）。

提示：

固定、脱水和浸润期间，必须一直不断地搅拌样本。

固定

建议在整个潜入过程中，在4°C温度条件下进行工作，以缩短固定时间，从而实现最佳免疫组织化学效果。将尽量小块化的组织（1mm厚）固定在2%的多聚甲quan醛溶液中，然后放入pH值为7.4的磷酸盐缓冲液中，在4°C温度条件下放置3至4个小时。在4°C温度条件下，向pH值为7.4的磷酸盐缓冲液中加入6.8%的蔗糖，然后将这些组织收回并在该溶液中放置12小时（过夜）。

脱水

在4°C温度条件下，将组织放在低温纯丙酮内至少1个小时进行脱水。在最初数分钟内尽量频繁更换，直至丙酮保持清澈。

浸润

制作浸液：

n Technovit 8100碱性溶液 100毫升

n + Technovit 8100硬化剂1 1袋，0.6g

溶解在清洁、无洗涤剂的PE或玻璃容器内，然后在4°C温度条件下放置。密封后，在4°C温度条件下，浸液稳定时间最长达4周。

直接将样本从丙酮转移至预冷浸液中。在4°C温度条件下，样本在其中放置6至10个小时。

聚合反应

制备聚合溶液：

n 浸液，4°C温度，15ml

n + Technovit 8100硬化剂2，已冷却，0.5ml

使用标准助吸器进行测量，再在PE或玻璃容器内混合均匀。然后，小心地将已浸润样本放入密封容器内并混合大约5分钟。

聚合溶液颜色首先变为黄绿色，但在硬化后，又变为无色。

使用一次性移液管，将Histoform腔注满，将组织放入其中，然后立即盖上透明PE膜。

可对嵌入腔使用多层薄膜，以使嵌入腔密封。请勿将气泡压出，而是要施用更多的聚合溶液，添加新的薄膜。聚合期间（至少3个小时），必须在4°C温度条件下，将嵌入模板放在冷却板或薄冰层上。请勿使模板或样本接触到水汽。

阻塞和归档

硬化结束后，立即使用镊子，在室温条件下移除薄膜。

样本被Histobloc ^® 和Technovit ^® 3040堵塞，因此可将它们从特氟隆模具上移除（参见第15页）。在凉爽温度条件下，将并非立即需要的块料（针对免疫组织化学）放在塑料袋或类似袋子内。

工艺

通过旋转切片机，采用Technovit Histoblade，结合贺利氏刀架或硬质金属刀（金刚石玻璃刀），可以获得最佳的切割效果。将块料紧紧夹持在切片机标识凸轮系统内。使用镊子以干燥方式移除切片，然后将其放在浴器内（蒸馏水）。直接将其放在带涂层的物体固定架上，在37°C温度条件下，使其干燥2个小时或更长时间。

在室温条件下，对并非立即需要的切片（针对免疫组织化学）进行干燥，在4°C温度条件下，存储时间可长达5天。

物体固定架涂层

例如，在65°C温度条件下，将物体固定架浸在0.5%的阿耳新蓝溶液（8GXL Sigma）中，持续15分钟，或在物体固定架上涂上一层0.1%的多聚赖氨酸(Sigma)溶液。所有标准带涂层物体固定架均可使用。

在37°C温度条件下，切片必须干燥至少2个小时。

将非降塑切片直接放在染色溶液中或从酶预处理开始。

示例

n 酶预处理：将切片放在含0.01%胰yi蛋白酶、0.1% CaCl（氯化钙）、pH值为7.8的溶液中培养5至10分钟。

n 在磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗多次，清洗时间达5分钟

n 在37°C温度条件下，使用原发性抗体，培养2个小时，期间更换多次

n 使用含0.06%过氧yang化氢的磷酸盐缓冲液(PBS)阻塞内源性过氧化物酶（室温条件下持续30分钟）

n 在磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗多次，清洗时间达5分钟

n 在室温条件下，使用第二抗体培养30分钟

n 在磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗多次，清洗时间达5分钟

n 二氨基联苯ben胺(DAB)，针对低温恒温器段

n 使用苏木精进行复染，持续10至15秒

n 在流水下呈现蓝色，持续3分钟

n 使用甘油明胶进行覆盖

可以使用AP、PAAP、APAAP、ABC、卵白素-生物su素，抗生蛋白链菌素和免疫荧光法来确定免疫因子。

不得在漂洗缓冲液内使用 吐温等润湿剂。过氧化物酶应溶解在缓冲液中。

由于组织化学和免疫组织化学的新的产品系列不断变化，应当遵循相应的制造商操作指导。